Come capire se la coltura liquida è contaminata

Per capire se la coltura liquida è contaminata bastano quattro controlli: il liquido deve essere limpido, il micelio bianco, l'odore neutro e la crescita deve presentarsi a filamenti o a grumi, non come una pellicola. Un liquido torbido di solito indica batteri; puntini colorati o una crescita lanuginosa in superficie di solito indicano muffa. Se noti uno di questi segnali, non iniettare la coltura.

Che aspetto ha una coltura liquida sana?

Una coltura liquida sana è un liquido limpido in cui galleggia micelio da bianco a bianco sporco. Il micelio può apparire come:

  • piccoli grumi simili a cotone che si spostano quando inclini la siringa;
  • filamenti sottili o una nuvola rada di fili;
  • un'unica massa più grande che si sfalda quando la agiti delicatamente.

Il liquido attorno al micelio resta trasparente. Può avere una leggera tinta gialla o ambrata, a seconda del brodo, ma non deve essere lattiginoso.

Quali segnali indicano una contaminazione?

Torbidità, colore, odore e una pellicola o una crescita lanuginosa sono i segnali d'allarme. Ne basta uno per non usare la coltura.

Quello che vediCausa probabileCosa fare
Liquido lattiginoso o torbido che non si schiarisce dopo il riposoBatteriNon usarla
Palline lanuginose o crescita colorata, spesso sulla superficie del liquidoMuffaNon usarla
Tinta rosa, arancione o rossaBatteri o lievitiNon usarla
Pellicola viscida in superficie o lungo la pareteBatteriNon usarla
Odore acido, di marcio o di aceto sulla puntaBatteri o lievitiNon usarla
Liquido limpido, grumi bianchiMicelio sanoUsala normalmente
Liquido limpido, un'unica massa bianca densaMicelio sano che si è compattatoAgita delicatamente, lascia che si scaldi, poi usala

Non fare la prova iniettando

Iniettare una coltura sospetta "per vedere cosa succede" ti costa un intero sacchetto di substrato e può diffondere spore di muffa nella tua zona di lavoro. Nel dubbio, fermati e contatta l'assistenza con foto nitide.

Come controllare correttamente una siringa?

1
Togli la siringa dal frigorifero e lascia che raggiunga la temperatura ambiente per circa un'ora.
2
Tienila controluce, per esempio davanti a una finestra o con la torcia del telefono dietro.
3
Guarda prima il liquido, poi il micelio. Ruota lentamente la siringa.
4
Agitala delicatamente e aspetta un minuto. Il micelio si deposita o galleggia a grumi; la torbidità batterica resta distribuita in modo uniforme.
5
Solo se il liquido ha già un aspetto strano, togli il cappuccio e annusa la punta. Una siringa dall'aspetto pulito non va aperta.

A parte il tempo per scaldarsi, il controllo richiede due minuti.

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Quali cambiamenti sono normali e innocui?

Alcune cose sembrano strane, ma non sono segno di contaminazione:

  • Micelio raggruppato sul fondo. In un liquido fermo il micelio si deposita. Agitando si sfalda di nuovo.
  • Un aspetto più denso dopo settimane in frigorifero. Il micelio continua a crescere molto lentamente al freddo.
  • Qualche minuscola bolla d'aria. Derivano dalla manipolazione e dal trasporto. Bolle che continuano a formarsi dopo che la siringa ha riposato, o la schiuma, sono un segnale d'allarme.
  • Una leggera differenza di colore tra le varietà. Alcuni brodi e alcune varietà danno al liquido una tinta più calda. Quello che conta è che sia limpido.

Come entra la contaminazione in una coltura liquida?

La contaminazione entra in tre momenti: durante la produzione, durante il trasporto e la conservazione, oppure durante la tua manipolazione. Mondo prepara ogni coltura da una piastra di Petri, seleziona la crescita pulita e controlla ogni lotto prima che venga messo nelle siringhe. Dopo di che, il rischio si sposta su ciò che succede durante il viaggio e a casa tua.

  • Calore. Un pacco lasciato in un'auto calda o in un ingresso caldo può permettere a pochi batteri di moltiplicarsi.
  • Scoprire la punta. Togliere il cappuccio, toccare la punta o lasciarla aperta mentre prepari il substrato espone la coltura.
  • Riutilizzare una siringa. Una siringa già usata e poi conservata di nuovo non è più sterile.

La nostra guida su come conservare la coltura liquida tratta nel dettaglio l'aspetto della conservazione.

E se il substrato si contamina dopo l'iniezione?

Se la coltura sembrava pulita e dopo l'iniezione il substrato diventa comunque verde o ha un odore acido, la causa è più spesso nella fase di inoculazione che nella coltura. Ricontrolla i passaggi di pulizia: mani, superficie, punta della siringa, ago e porta di iniezione. La nostra guida alla contaminazione del kit di coltivazione mostra come distinguere la muffa dalle macchie blu e dai metaboliti innocui nel substrato, e il nostro confronto coltura liquida vs siringa di spore spiega perché i problemi si vedono più chiaramente nella coltura liquida che nelle soluzioni di spore.

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Domande sulla contaminazione della coltura liquida

Non in modo affidabile a casa. Separare il micelio dai batteri richiede lavoro su agar e un ambiente sterile. Per la maggior parte dei coltivatori è meglio sostituire la coltura.

Sì. Lascia la siringa chiusa a temperatura ambiente per circa 24 ore e ricontrolla. Una contaminazione rallentata dal freddo spesso diventa visibile in quel lasso di tempo.

Agita delicatamente la siringa e guardala di nuovo controluce: i filamenti piccoli possono essere difficili da vedere. Se il liquido è limpido e dopo averla agitata non vedi nulla, contatta l'assistenza con una foto.

Il freddo rallenta la contaminazione, quindi può diventare visibile solo dopo che la siringa è rimasta per un po' a temperatura ambiente. È uno dei motivi per controllare la siringa dopo che si è scaldata.

Sì. Invia il numero d'ordine e foto nitide all'assistenza Mondo prima di usare o buttare la siringa.

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