Comment savoir si une culture liquide est contaminée

Savoir si une culture liquide est contaminée se résume à quatre contrôles : le liquide doit être limpide, le mycélium blanc, l'odeur neutre, et la croissance doit prendre la forme de filaments ou d'amas plutôt que d'un film. Un liquide trouble signale généralement des bactéries ; des points colorés ou une croissance duveteuse en surface signalent généralement une moisissure. Si l'un de ces signes apparaît, n'injectez pas la culture.

À quoi ressemble une culture liquide saine ?

Une culture liquide saine est un liquide limpide dans lequel flotte un mycélium blanc à blanc cassé. Le mycélium peut prendre la forme :

  • de petits amas cotonneux qui dérivent quand vous inclinez la seringue ;
  • de fins filaments ou d'un nuage lâche de fils ;
  • d'une masse plus grosse qui se désagrège quand vous secouez doucement.

Le liquide autour du mycélium reste transparent. Il peut avoir une légère teinte jaune ou ambrée selon le bouillon, mais il ne doit pas être laiteux.

Quels signes indiquent une contamination ?

Un trouble, une coloration, une odeur, un film ou une croissance duveteuse : ce sont les signaux d'alerte. Un seul d'entre eux suffit pour ne pas utiliser la culture.

Ce que vous voyezCause probableQue faire
Liquide laiteux ou trouble qui ne s'éclaircit pas après reposBactériesNe pas utiliser
Boules duveteuses ou croissance colorée, souvent à la surface du liquideMoisissureNe pas utiliser
Teinte rose, orange ou rougeBactéries ou levuresNe pas utiliser
Film visqueux en surface ou le long de la paroiBactériesNe pas utiliser
Odeur aigre, de pourri ou de vinaigre à l'emboutBactéries ou levuresNe pas utiliser
Liquide limpide, amas blancsMycélium sainUtiliser normalement
Liquide limpide, une seule masse blanche denseMycélium sain qui s'est aggloméréSecouer doucement, laisser revenir à température, puis utiliser

Ne testez pas en injectant

Injecter une culture suspecte « pour voir ce qui se passe » vous coûte un sac de substrat entier et peut disperser des spores de moisissure dans votre espace de travail. En cas de doute, arrêtez-vous et contactez le service client avec des photos nettes.

Comment bien contrôler une seringue ?

1
Sortez la seringue du réfrigérateur et laissez-la revenir à température ambiante pendant environ une heure.
2
Tenez-la devant une lumière vive, par exemple une fenêtre ou la lampe d'un téléphone placée derrière.
3
Regardez d'abord le liquide, puis le mycélium. Faites tourner lentement la seringue.
4
Secouez-la doucement et attendez une minute. Le mycélium se dépose ou flotte en amas ; un trouble bactérien reste réparti uniformément.
5
Seulement si le liquide semble déjà suspect, retirez le capuchon et sentez l'embout. Une seringue d'aspect propre n'a pas besoin d'être ouverte.

Hormis le temps de remise à température, le contrôle prend deux minutes.

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Quels changements sont normaux et sans danger ?

Plusieurs choses semblent étranges sans être une contamination:

  • Mycélium aggloméré au fond. Dans un liquide immobile, le mycélium se dépose. Secouer le disperse à nouveau.
  • Un aspect plus dense après des semaines au réfrigérateur. Le mycélium continue de croître très lentement au froid.
  • Quelques minuscules bulles d'air. Elles proviennent des manipulations et du transport. Des bulles qui continuent de se former après que la seringue a reposé, ou de la mousse, sont un signal d'alerte.
  • Une légère différence de couleur entre souches. Certains bouillons et certaines souches donnent une teinte plus chaude au liquide. L'essentiel est qu'il reste limpide.

Comment la contamination pénètre-t-elle dans une culture liquide ?

La contamination pénètre à trois moments : pendant la production, pendant le transport et le stockage, ou lors de vos propres manipulations. Mondo prépare chaque culture à partir d'une boîte de Petri, sélectionne une croissance propre et contrôle chaque lot avant sa mise en seringue. Ensuite, le risque se déplace vers ce qui se passe en route et chez vous.

  • Chaleur. Un colis laissé dans une voiture ou une entrée surchauffée peut permettre à un petit nombre de bactéries de se multiplier.
  • Ouvrir l'embout. Retirer le capuchon, toucher l'embout ou le laisser ouvert pendant que vous préparez le substrat expose la culture.
  • Réutiliser une seringue. Une seringue utilisée puis remise de côté n'est plus stérile.

Notre guide sur la conservation des cultures liquides détaille l'aspect stockage.

Et si le substrat se contamine après l'injection ?

Si la culture paraissait propre et que le substrat verdit ou sent l'aigre après l'injection, la cause se trouve plus souvent dans l'étape d'inoculation que dans la culture. Vérifiez les étapes de nettoyage : mains, plan de travail, embout de la seringue, aiguille et port d'injection. Notre guide sur la contamination du kit de culture montre comment distinguer la moisissure des bleuissements et des métabolites inoffensifs dans le substrat, et notre comparatif « culture liquide vs seringue de spores » explique pourquoi les problèmes se voient plus nettement dans une culture liquide que dans une solution de spores.

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Questions sur la contamination des cultures liquides

Pas de manière fiable à la maison. Séparer le mycélium des bactéries demande un travail sur agar et un environnement stérile. Pour la plupart des cultivateurs, mieux vaut remplacer la culture.

Oui. Laissez la seringue fermée à température ambiante pendant environ 24 heures, puis contrôlez de nouveau. Une contamination ralentie par le froid devient souvent visible dans ce délai.

Secouez doucement la seringue et regardez à nouveau devant une source de lumière ; les petits filaments peuvent être difficiles à voir. Si le liquide est limpide et que vous ne voyez rien après l'avoir secouée, contactez le service client avec une photo.

Le froid ralentit la contamination, qui peut donc n'apparaître qu'après un certain temps à température ambiante. C'est l'une des raisons de contrôler la seringue une fois qu'elle s'est réchauffée.

Oui. Envoyez votre numéro de commande et des photos nettes au service client Mondo avant d'utiliser ou de jeter la seringue.

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